河豚毒素的化学式是什么？

1. 河豚毒素的化学式是什么？

河豚毒素（Tetrodotoxin,TTX）



TTX是有高选择性的钠离子通道的阻断剂，是神经毒素。大量的TTX是有巨毒的，0.5毫克TTX即可使人死亡。但近年来发现微量的TTX对人有非常有效的作用。如晚期癌症病人受疼痛之苦，多用有依赖性的可卡因、杜冷丁、和吗啡等来止痛和镇静，但这些依赖性药物用量需逐渐加大，才能起到效果，而TTX没有任何依赖性，即称无瘾性或非阿片肽性，TTX起效迅速，很少有副作用，可以口服，也可注射，且它的效力比吗啡高3200倍。1999年用于晚期肺癌的11个病历，都取得成功的结果。就目前来看，TTX可有三方面作用，即止痛、戒毒和局部麻醉等功效。据加拿大威克斯公司报道，在止痛方面，可用于癌症病人、神经痛病人和背痛病人；在戒毒方面，可用于使用依赖性麻醉病人或其他人群；在麻醉方面，可用于牙科治疗、烧伤治疗或其他治疗中。因此，TTX作为药物有广泛和不可取代的应用价值。

河豚毒素的毒理作用主要是毒素选择性地阻断钠离子透过神经细胞膜，从而阻断了神经系统的兴奋传导，使机体发生神经性麻痹，因而出现呼吸麻痹，血压下降，由于呼吸中枢深度麻痹窒息死亡。
临床上，河琢毒素针剂可代替吗啡、度冷丁、阿托品和南美筒箭毒。用于治疗神经痛，起效较吗啡慢，但镇痛时间可达12-20小时:
一、用作镇痛剂、麻醉剂，对于神经痛、肌肉和关节创伤产生的疼痛，对晚期癌痛有显著镇痛作用，且不成臆。用于局部麻痹要比一般局部麻经强上万倍，比普鲁卡因强16万倍，比狄布卡因(DIBUCCAINE)强1万倍。
二、用作搔痒镇静剂，对皮肤搔痒症可以止痒而促其痊愈。
三、用于呼吸镇静剂，治气喘和百日咳。
四、用于镇痉剂，治疗松驰肌肉痉挛，胃痉挛和破伤风痉挛等病的特效药。
五、由于河琢毒素具有充血作用，对阳屡和妇女阴冷也有效。
六、具有尿意镇静作用，对遗尿症有良效。
七、这种毒素还是生化试剂和皮肤防皱剂

2. 河豚的毒素主要在

3. 请问河豚鱼毒素(TTX)的检测方法是什么?有国标吗?有没有快速检测方法及其相关资料呀??

河豚毒素（TTX）定量酶联免疫检测试剂盒说明书
ELISA-kit for TTX
 
本测试盒用间接竞争免疫分析法定量测定河豚鱼中的河豚毒素（TTX）。该测试盒反应孔可拆卸，可测单份样品，也可测多份样品。定量分析时需有含450nm波长的微孔板酶标仪。
 
1 概要
河豚毒素（TTX）是一种强神经毒素，其性质稳定，加热、盐腌及高温烹煮均不易使其被破坏。河豚鱼中常含有河豚毒素。我国沿海居民素有食用河豚鱼的习惯。因误食或食用加工不当的河豚鱼而发生人畜中毒的事件每年都有发生。故准确检测河豚鱼中的河豚毒素对预防和控制河豚毒素中毒，具有重要意义。本检测方法具有灵敏、快速、简便、特异性好、取样量小并可同时检测大量样品等优点。
 
2 测定原理
本试剂盒采用固相酶联免疫吸附原理，利用间接竞争ELISA法进行测定。用抗原包被微孔板，加入河豚毒素标准品或样品、抗河豚毒素单克隆抗体进行孵育后，将未与包被抗原结合的抗体洗去；再加入酶标记的抗鼠IgG抗体孵育，加入显色液，经过终止液终止后，用酶标仪在450nm处测定OD值。
 
3 提供的物品
微孔板
5个浓度的TTX标准溶液（各0.5mL）
标准1：0ng/mL   ……………………………………………………………直接使用
标准2：10.0ng/mL      ………………………………………………………直接使用
标准3：20.0ng/mL      ………………………………………………………直接使用
标准4：50.0ng/mL      ………………………………………………………直接使用
标准5：200.0ng/mL    ………………………………………………………直接使用
抗体溶液(6mL)     …………………………………………………………………直接使用
酶标物(12mL)       …………………………………………………………………直接使用
显色液(12mL)       …………………………………………………………………直接使用
终止液(6mL) ………………………………………………………………………直接使用
浓缩洗液(30mL)   …………………………………………………………………稀释使用
 
4 盒中未提供，需自备物品
微孔板酶标仪（含450nm）、离心机、电炉、微量移液器、磁力搅拌器
量筒、漏斗、容量瓶、快速定性滤纸、分液漏斗
乙酸、氢氧化钠、去离子水或蒸馏水、PBS缓冲液
 
 
5 操作者注意事项
        标准溶液中含有TTX毒素，应特别小心。
终止液为0.5M硫酸，避免接触皮肤。
每次加样后立即将所有试剂放回2~8 ℃。
每步加样时间应控制在5min内。
孵育过程中应避光。
不要使用过期试剂盒。
        不要交叉使用不同批号试剂盒中的试剂。
 
 
6 储存条件
        保存试剂盒于2~8℃。不要冷冻
        显色液对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。
        将不用的微孔板放进原铝箔袋中，置2~8℃保存。
 
7 试剂变质的标志
        标准1的吸光度值小于0.5个单位（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。
 
8 样品处理
8.1 鲜河豚鱼中河豚毒素的检测
----称取5g河豚鱼样品(肌肉、皮或内脏)，剪碎，加入25mL 0.1%的乙酸，用烧杯在电炉上煮沸搅拌10min。此步骤应注意不要让液体沸出容器，应控制加热温度，并不断搅拌。
----待冷却至室温后，上清用快速定性滤纸过滤于50mL离心管中
----沉淀用20mL0.1% 乙酸洗到烧杯中，再煮沸3min
----冷却至室温后，所有的液体及煮沸的样品都加到离心管中，3000rpm离心10min。
----取上清，量体积，置分液漏斗中
----加入等体积乙醚，振摇1分钟，静置分层。放出水层，量体积后至另一分液漏斗中，再加入等体积的乙醚，振摇1分钟，静止分层。
----将水层放入50mL容量瓶中，用1M氢氧化钠调节提取液中的pH值至6.5~7.4，然后加入PBS至50mL，提取液4℃保存备用。
8.2 鱼片、鱼干制品中河豚毒素的检测
-----样品中的TTX用0.1%乙酸在水浴中超声提取，提取液中的TTX用ELISA方法进行检测，若样品中TTX含量低于检出限则报告为<100mg/kg；样品中TTX含量在100~3000mg/kg之间，直接按ELISA实验结果报告；如果样品中TTX含量达到3000mg/kg，则需采用小鼠生物测定法进行验证，确认毒性反应后再按照ELISA实验结果报告。
 
9 酶免疫分析程序
----浓缩洗液为10倍浓缩液，使用时与去离子水或蒸馏水按体积比1:9稀释后使用。
----取所需数量的板条插入微孔架，用洗液洗涤微孔板3min×2次，记录样品及标准的位置。
        ----加入50mL标准品或处理好的样品到微孔，每个标准和样品必须使用新的吸头。
----加入50mL抗河豚毒素单克隆抗体溶液到每个微孔（注意移液器管尖不要接触到孔中的液体，避免交叉污染）中，37℃孵育90min。
----甩掉孔中液体，用洗液洗涤微孔板3min×3次，最后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。
    ----每孔加入酶标物100mL，37℃孵育60min。
    ----用洗液洗涤微孔板3min×5次，最后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。
    ----每孔加入显色液100mL（2滴），37℃孵育12min。
    ----每孔加入终止液50mL（1滴），立即用酶标仪在波长450nm处测定吸光度值（OD值）。
注：在定量分析中，显色液和终止液需要用移液器准确量取。
 
10 样品浓度计算
以标准溶液OD值与标准1的OD值的比值为纵坐标（即标准品OD比），所对应标准溶液浓度（ng/mL）的对数值为横坐标，制作标准曲线。根据样品OD值与标准1的OD的比值（即样品OD比），可从曲线上得到对应点的横坐标，即为TTX浓度的对数值，求得反对数即为测定液中TTX浓度C（ng/mL），按下列公式计算出样品中TTX含量：
TTX含量（mg/kg）= 10×C×K
式中：C：测定液中TTX浓度（ng/mL）
            K：提取液的稀释倍数
11 主要技术指标及参数
11.1  最低检出浓度10.0 ng/mL。
11.2  加标回收率在70~120%，条内变异系数＜10%，条件变异系数＜15%。

4. 河鲀毒素的毒理

 1982年，美国植物学家韦德-戴维斯发现，海地巫毒教中的回魂大师在药物中使用含有从河鲀提取的毒素粉末，整个过程里中毒者大脑能完全保持清醒，如果能挺过24h，他们就会很快恢复正常，且不会出现并发症。使人们相信他们有使人“死而后生”的能力，即所谓的“还魂术”。其实，这是由于河鲀毒素的特殊结构使其像塞子一样，凝固在神经轴突的钠离子通道的入口处，阻碍钠离子透过细胞膜传导神经的冲动，从而关闭神经系统。由于河鲀毒素不能越过大脑中血液细胞的屏障，因此受害者就会处于大脑清醒的无助状态之中。几小时或几天过后，当河鲀毒素最终开放钠离子通道时大多数受害者已经死亡。 河鲀毒素离子谱图图册参考资料。  TTX是典型的钠离子通道阻断剂，它能选择性与肌肉、神经细胞的细胞膜表面的钠离子通道受体结合，阻断电压依赖性钠离子通道，从而阻滞动物电位，抑制神经肌肉间兴奋的传导，导致与之相关的生理机能的障碍，主要造成肌肉和神经的麻痹。构效关系表明，TTX的活性基团是1，2，3 位的胍氨基和附近的C-4，C-9，C-10 位的羟基，胍基在生理pH值下发生质子化，形成正电活性区域与钠离子通道受体蛋白的负电性羰基相互作用，从而阻碍离子进入通道。钠离子受体至少有6个特异性靶分子结合位点，TTX是与钠通道受体部位I结合。TTX受体位于可兴奋细胞膜外侧、钠通道外口附近，TTX与受体部位结合，阻碍钠离子接近通道外口。研究表明，TTX特异性作用于钠通道，对钾、钙通道和神经肌肉的突触及胆碱指酶无直接影响。此外，毒素能通过血脑屏障进入中枢，对中枢产生明显的抑制作用。总的来说，TTX对呼吸和心血管的抑制是对中枢和外周的共同作用结果。 河鲀毒素毒理作用的主要表征是阻遏神经和肌肉的传导。除直接作用于胃肠道引起局部刺激症状外，河鲀毒素被机体吸收进入血液后，能迅速使神经末梢和神经中枢发生麻痹，继而使得各随意肌的运动神经麻痹；毒量增大时会毒及迷走神经，影响呼吸，造成脉搏迟缓；严重时体温和血压下降，最后导致血管运动神经和呼吸神经中枢麻痹而迅速死亡。TTX可选择性地抑制可兴奋膜的电压，阻碍Na+通道的开放，从而阻止神经冲动的发生和传导，使神经肌肉丧失兴奋性。 此后，多数研究工作都是围绕着TTX阻断可兴奋组织的Na+通道而展开。河鲀对TTX具有抵抗力和免疫性。如果该区域出现由芳香性氨基酸向非芳香性氨基酸的氨基酸置换，就会显著影响它与TTX结合的灵敏度。在对河鲀毒素没有免疫力的生物体内，钠通道的α-亚基上存在河鲀毒素的受体，河鲀毒素与α-亚基门孔附近的氨基酸残基结合，阻止钠离子进入细胞内，引起河鲀毒素中毒 。而河鲀体内细胞的构造与其他生物不同，河鲀体内还存在可以与河鲀毒素结合的其他蛋白质，从而使河鲀对体内的河鲀毒素具有免疫力。比较红鳍东方鲀（Fugu rubripes）、黑青斑东方鲀（Tetraodon nigroviridis）和斑马鱼的基因序列图谱，发现红鳍东方鲀和黑青斑东方鲀骨骼肌的Nav1.4通道发生了变异，正是这种变异使河鲀具有抵抗河鲀毒素的能力。红鳍东方鲀和豹纹东方鲀的变异类似，都是在Nav1.4通道的401位点上发生了取代，取代为一个折叠程度更高的不饱和氨基酸。 河鲀的这些氨基酸是不与河鲀毒素结合的，从而也就不能对河鲀的钠通道造成影响。通过克隆调控豹纹东方鲀骨骼肌Nav1.4通道表达的cDNA，发现Nav1.4通道区域Ⅰ401位点处存在一个不饱和氨基酸，即天冬酰胺。通过基因工程把不饱和氨基酸移植到对河鲀毒素敏感的小鼠骨骼肌Nav1.4通道处，移植的不饱和氨基酸的折叠程度越高，小鼠抵抗河鲀毒素的能力越强。当不饱和氨基酸的折叠程度大于取代位点氨基酸折叠程度的2500倍时，IC50（50%Na+通道发生阻断时河鲀毒素的浓度）提高至47μmol/L。 一些生物对河鲀毒素的耐受性与其独特的钠离子通道结构有关。研究发现，3×10^-6M的河鲀毒素对Arothron hispidus等7种河鲀鱼肌肉的动作电位没有影响，而3×10^-7M的河鲀毒素却阻断了3种不含河鲀毒素的其他鱼的动作电位。河鲀毒素的结合位点位于钠离子通道内高度保守的成孔区域（P-loop），对河鲀毒素敏感的钠离子通道（TTX-sensitiveNa+channel）在该区域有与TTX高度亲和的芳香性氨基酸。 如果该区出现由芳香性氨基酸向非芳香性氨基酸的氨基酸置换，就会显著影响其与TTX结合的灵敏度，从而使钠离子通道成为抗河鲀毒素的钠离子通道（TTX-resistantNa+channel）。通过对河鲀鱼（Fugu pardalis）骨骼肌Nav1.4通道的cDNA基因序列图谱的研究发现，通道的结构域I的成孔区域的401位置包含有一个非芳香氨基酸，即天冬酰胺酸，而此位点发生的氨基酸置换可能与河鲀鱼对高浓度的TTX耐受有关。在捕食与防御的长期进化过程中，在北美西部，一些束带蛇对河鲀毒素也具备了一定的耐受力，而且，不同地区的束带蛇对河鲀毒素的耐受力也有明显差异。对这些束带蛇的Nav1.4通道进行分析发现，他们的芳香氨基酸在401位点是保守的，但在结构域IV的成孔区域发生了几处氨基酸置换。 在WillowCreek地区的束带蛇的Nav1.4通道的结构域IV包含有3个氨基酸的置换，该地区束带蛇对TTX的耐受力比Benton地区的高两个数量级，因为后者只包含1个氨基酸替代。只在河鲀鱼与束带蛇中发现它们对河鲀毒素的耐受性与其骨骼肌和神经元的钠离子通道发生了氨基酸替代有关。这两种生物之间的一个主要差别就是，几乎所有的河鲀鱼对TTX都有一定的耐受性，而且有相同耐受机制，但是只有一部分束带蛇具有对TTX的耐受力。  起源内因说主张内因说的学者认为，河鲀等生物体含有的刺胞、毒腺中的蛋白质毒素是内源性毒素的来源。他们推测河鲀鱼体内有特定功能或微生物，能将摄入的食物转化为毒素。但始终没有更多证据证实这种说法，因此内因说没有得到广泛认可。不少研究者认为，许多海洋细菌能产生河鲀毒素，作为河鲀鱼类食物的一些动物，如海星等也含有河鲀毒素，而人工饲养的河鲀却没有河鲀毒素，表明河鲀本身并无产生TTX的能力。但后来河鲀毒素由细菌产生的观点遭到了反驳，Kmatsumura在1995年就发现从解藻朊酸弧菌（Vibrio alginolyiicus）中提取出来的河鲀毒素并没有与河鲀毒素的单克隆抗体发生反应，认为生物鉴定法存在弊端，因此有必要重新认识“TTX是由细菌产生的”这一观点。为了证实产生河鲀毒素的原因是内源性的，Kendo于1998年提取了星点东方鲀成熟的卵细胞进行人工授精及胚胎培育，发现在孵化过程中胚胎体内河鲀毒素的含量一直在增加。这表明增加的毒素是胚胎的产物。由此可知，河鲀体内的TTX可能并非直接来源于细菌，而是河鲀本身与其体内共生细菌共同的产物。河鲀等动物自身是否具有分泌毒素的功能，以及河鲀毒素如何在机体各器官内发生转移等，还有待进一步研究。   而且，河鲀毒素在河鲀之外的物种分布，和河鲀体内细菌能分泌河鲀毒素等现象，不能说明河鲀本身不能产生河鲀毒素。Matsumura就对河鲀毒素的细菌起源提出了质疑，他发现弧菌（Vibrioalginolyticus）所产的河鲀毒素并不能和河鲀毒素的单克隆抗体反应，说明细菌产生的河鲀毒素与河鲀体内的河鲀毒素并不完全相同。 但细菌产生的河鲀毒素同样能使小鼠致死，说明其可能是河鲀毒素的衍生物。但是，内源假说同样不能解释一些事实，仅在投喂配合饲料的条件下，人工养殖的河鲀体内的河鲀毒素没有或含量很低，此事实很难用内源假说来解释。Matsui等认为河鲀体内有一种能够储藏TTX的机制。但是，如果河鲀仅仅能储藏河鲀毒素，同样也难以解释胚胎发育过程中河鲀毒素含量一直在增加的现象。 因此，河鲀体内的河鲀毒素极有可能是河鲀与其体内共生细菌共同的产物，体内共生细菌产生河鲀毒素的衍生物，河鲀把此衍生物转化为河鲀自身的河鲀毒素。河鲀胚胎发育过程中河鲀毒素含量一直在增加，可能是共生细菌产生的河鲀毒素衍生物，在卵子受精前就已经累积在卵中，受精后的胚胎发育过程中，河鲀胚胎逐渐具备把此衍生物转化为自身河鲀毒素的能力。因此，胚胎发育过程中河鲀毒素含量可持续增加。   外因说在Mosher等从加州蝾螈（Tarichatorosa）中分离到河鲀毒素以前，河鲀毒素一直被认为是河鲀产生的，之后，在虾虎鱼、蛙类、马蹄蟹、海星、纽虫、箭虫、环节动物、石灰质藻类等中均分离到河鲀毒素，使人们相信河鲀毒素的分布比较广泛。1986年，Noguchi等首次报道了从花纹爱洁蟹（Atergatisfloridus）的肠道内分离到一种产河鲀毒素的细菌，1987年，Noguchi等从虫纹东方鲀肠道中也分离出能产河鲀毒素的细菌Vibrio alginolyticus，此后，从各种动物的多种动物体内或体表、海洋沉积物、淡水沉积物中也分离到了产河鲀毒素及其衍生物的各种微生物，这些发现，使人们更加相信河鲀体内河鲀毒素的体外起源假说，日本的清水、松居是最早提出“外因说”的学者。他们用含TTX的饵料饲喂人工养殖的无毒河鲀及人工采苗后饲养的河鲀，结果这些无毒河鲀发生毒化现象。由此推测，毒素的起源可能是外因性的。该假说认为河鲀体内河鲀毒素来源于环境中的河鲀毒素或产河鲀毒素的细菌。     Noguchi等采用小鼠和液相-质谱技术调查了日本1990到2003期间在离开海底10米以上的网箱养殖红鳍东方鲀的河鲀毒素毒性情况，在肝脏、皮肤、肌肉、性腺中均没有检测到河鲀毒素（检测灵敏度<0.1MU/g），表明喂养人工配合饲料的红鳍东方鲀没有毒性，说明可以通过远离海底沉积物能有效培养无毒的红鳍东方鲀。 而Hwang等发现，不同水质对人工养殖的红鳍东方鲀的毒性往往是有影响的，在台北宜兰县两个养殖基地养殖的红鳍东方鲀是无毒的，而在毗邻的台北县养殖基地养殖的红鳍东方鲀的卵巢在1-3月是有毒的，肝脏在1-3月是有弱毒的。 江苏宜兴人工养殖的暗纹东方鲀所有受检的器官组织均是无毒的。采用投喂配合饲料和在淡水环境养殖暗纹东方鲀，其1-3龄均为无毒或低毒。 华元渝等采用高效液相色谱仪和荧光分光光度计联合法随机抽样检验经过纯全人工繁殖、苗种培育至商品鱼的暗纹东方鲀毒性，结果表明其体内4种组织器官中的河鲀毒素平均含量低于2μg/g，属基本无毒。 Nagashima等提出河鲀体内的毒素是通过食物链富集的，河鲀肝脏的薄切片吸收河鲀毒素的能力比其他鱼类肝脏的薄切片要强。实验也证明，人工养殖的河鲀不含河鲀毒素，但是在饲料中添加有毒河鲀的肝脏，养殖河鲀体内就含有河鲀毒素。大多数学者认为河鲀体内的河鲀毒素是受食物链和微生物双重影响的结果。 在河鲀毒素起源方面研究得最多的是东方鲀。一般认为，降海洄游的河鲀产生河鲀毒素的可能性有以下几种：（1）东方鲀下海后在海水环境中自身产生TTX；（2）海水中某些生物含有TTX，被河鲀吞食后吸收并储藏、浓集于体内；（3）许多海洋生物的代谢产物中含有TTX。从研究来看，河鲀自身产生河鲀毒素的可能性不大，因为除了河鲀外，海洋中还有许多河鲀喜食的生物体内都含有TTX。另外，生存于淡水中未经降海洄游的河鲀体内检不出TTX，也说明河鲀自身不产毒。但在投喂含TTX的饲料一段时间后，其体内又能检出TTX。因此，TTX很有可能是通过食物链在河鲀体内聚集的。而且，海洋中许多含毒细菌黏附于河鲀喜食的生物体表，进入河鲀体内后就与其形成互利共生的关系，河鲀可通过皮肤腺的暴露来释放TTX，从而起到抵御天敌的作用。 Noguchi等在对麻痹性贝毒导致蟹类毒化的机制的追踪过程中，从石灰藻及毒蟹内脏中分离到了可产生毒素的细菌，经鉴定，它们是假单胞菌属（Pseudomonassp.）细菌。 从该菌培养液中得到的两种毒素，经FLD-HPLC法及红外光谱、质谱分析法分析，确证为TTX及脱水TTX。进一步将其分别注射入小鼠腹腔，显示了与TTX和脱水-TTX相对应的致死率，从而确证TTX为细菌的代谢产物。Thuesen等从4种毛颚动物（Chaetognatha）体内分离到34株弧菌属（Vibriosp.）海洋细菌，其培养物和胞外产物均可阻断Na+通道。经组织培养法及液相色谱等方法同样确证该产物为TTX。 由此可见，产TTX的细菌是多样性的。吴韶菊等通过分离和筛选河鲀各个器官内的细菌，从36种细菌中挑选出了20种能分泌TTX的细菌，并发现卵巢和肝脏中TTX的含量高，其内部所含的菌株数量和毒性也都比其他组织高，从而说明河鲀所含的TTX与其共生细菌密切相关。 河鲀毒素的“体外起源”假说假定所有能产生TTX的生物都与其体内能分泌TTX的微生物有着密切联系，并且已被随后从各种携带TTX的生物体内提取出来的能产生TTX的细菌所证实。另外，TTX的累积机制不仅可通过食物链获得，也能由其自身肠道内的细菌产生，因为海洋中有些生物也摄食与河鲀同样的食物，但它们的体内并不含有TTX，从而估计河鲀体内有一种能够储藏TTX的机制。大多数研究者都认为，河鲀体内的TTX是受食物链和微生物双重影响的结果。 河鲀体内TTX的含量不仅存在个体间的差异，并且其体内各组织中TTX的含量也存在明显的差异。一般卵巢和肝脏中含量最多，精巢次之，皮肤和肌肉中则是微量或没有。Yuji等将河鲀的肝脏组织培养在含TTX的培养液中，发现它能吸收TTX，证明河鲀肝脏并不能分泌TTX，而是吸收体外的TTX。这也进一步证明了河鲀体内的TTX是外源性的。 其他学说有学者从免疫学的角度对河鲀富集河鲀毒素的机制进行了解释。用河鲀毒素做生物免疫实验，用相同浓度的河鲀毒素微量注射于有毒河鲀、无毒河鲀和小鼠体内做毒性实验。结果发现，有毒河鲀对河鲀毒素的免疫耐受能力最强，无毒河鲀的免疫耐受能力比小鼠的强。由此推断，有毒河鲀对河鲀毒素具有特殊的免疫耐受调控机制。也有学者从分子生物学角度进行了论证。 Yotsu-YamashitaM等研究认为，在河鲀体内存在一种蛋白质，可与河鲀毒素联结形成复合物，Matsui等也已经从星点东方鲀中提取出了河鲀毒素与蛋白质联结形成的复合物。 Jeen等从河鲀肝脏内提取mRNA，逆转录得到cDNA，通过cDNA末端扩增，发现cDNA中纤维蛋白原基因（flp）的含量与河鲀毒素的毒力水平呈线性关系。由此可以推断，河鲀体内的河鲀毒素是与蛋白质联结在一起以复合物的形式存在，并且河鲀毒素的含量是受基因调控的。人们对河鲀富集河鲀毒素的机理从不同的角度进行了论证，但没有形成统一的观点。不过养殖的河鲀毒性较低，这为开放河鲀鱼市场提供了理论依据。

5. ttx是什么？

1、河鲀毒素（tetrodotoxin,TTX）是鲀鱼类（俗称河豚鱼）及其它生物体内含有的一种生物碱。
为氨基全氢喹唑啉型化合物，是自然界中所发现的毒性最大的神经毒素之一，曾一度被认为是自然界中毒性最强的非蛋白类毒素。毒素对肠道有局部刺激作用，吸收后迅速作用于神经末梢和神经中枢，可高选择性和高亲和性地阻断神经兴奋膜上钠离子通道，阻碍神经传导，从而引起神经麻痹而致死亡。
2、TTX（Try&Trust&X） TTX品牌是石泰集团旗下品牌创立于德国，第一个“T”是“Try”，不断尝试、勇于实践，第二个“T”是“Trust”，信任员工、信任客户，“X”代表着所服务的众多五星级酒店客户。

扩展资料：
河鲀的分布：
在公元前2500年前的中国和埃及，人们就已知道有些鲀形目鱼类（河鲀）有毒，河鲀毒素之名，也因河鲀而起。而人们通常所指的河鲀（并非河豚）（puffer fish），为鲀科鱼类，泛指硬骨鱼纲、鲀形目、鲀科的各属鱼类，鲀科鱼类是最常见的含河鲀毒素的水产品。中国的鲀科鱼类共有54种，其中东方鲀属22种。
根据伍汉霖等调查，中国共有35种河鲀具有不同程度的河鲀毒性，其中，在中国南海分布的有24种，在中国东海包括台湾沿海分布的有31种，在中国黄海分布的有14种，在中国渤海分布的有10种。
少数种类能洄游进入江河，如晕环东方鲀（Takifugu coronoidus）、暗纹东方鲀（Takifugu fasciatus）、弓斑东方鲀（Takifugu ocellatus）、铅点东方鲀（Fugu alboplumbeu）、兔头鲀（Lagocephalus lagocephalus）、横纹东方鲀（Takifuguoblongus）等。
这些鱼类年产量约在3-4万吨，占世界河鲀总产量的70%左右。
参考资料来源：百度百科-河鲀毒素

6. 一只河豚所含的毒素是多少

认为是自然界中毒性最强的非蛋白类毒素。河鲀毒素的化学性质稳定，一般烹调手段难以破坏。中毒后也缺乏有效的解救措施。河豚毒素纯品的国际市场价每克可达21万美元，具有极高商业价值。高温的动物性碱，为自然界毒性最强的非蛋白物质之一。其五千万分之一，就能在30分钟内麻醉神经，对人体的最低致死量为0.5毫克。

但是这种极强的毒素，能溶入水，易溶于稀醋酸中，240℃便开始炭化。在弱碱溶液里（以4%氢氧化钠处理20分钟），马上就被破坏为葡萄糖化合物而失去毒性。

在100℃加热4小时或115℃加热3小时，或120℃加热30分钟，或200℃以上加热10分钟，便可使毒素完全破坏，毒性消失。120℃1小时才能破坏，盐腌、日晒亦均不能破坏毒素。毒素主要存在于河豚的性腺、肝脏、脾脏、眼睛、皮肤、血液等部位，卵巢和肝脏有剧毒，其次为肾脏、血液、眼睛、鳃和皮肤，精巢和肉多为弱毒或无毒。在熟制河豚时，一定要严格细心地除去河豚的bai脏、眼睛，剔去鱼腮，剥去鱼皮，去净筋血，用清水反复洗净。河豚鱼肉质特别细嫩，味美，营养丰富。它的药用价值很高，从其肝脏、卵巢的毒素中，可提练出河豚素、河豚酸、河豚巢素等名贵药材。每年春季是河豚鱼的产卵季节，这时鱼的毒性最强，所以，春天是人食用河豚鱼中毒的高发季节。我国《水产品卫生管理办法》明确规定：“河豚鱼有剧毒，不得流入市场。捕获的有毒鱼类，如河豚鱼应拣出装箱，专门固定存放”，所以，河豚鱼还是不吃为好。仅有少数人是拼死吃河豚，但多数人是因不认识河豚鱼而不小心吃了引起中毒。

7. 河鲀毒素的物化性质

 河鲀毒素（tetradotoxin，简写为TTX）系小分子量非蛋白质神经毒素，中毒潜伏期短，死亡率高，毒素吸收后迅速作用于末梢神经和中枢神经系统，使神经传导产生障碍，首先感觉神经麻痹，而后运动神经麻痹，严重者脑干麻痹导致呼吸循环衰竭。河鲀的表皮、内脏、血液、睾丸、卵巢、肝、脾、眼球等不同组织中含有河鲀毒素（tetrodotoxin，TTX），它是一种剧毒的非蛋白神经毒素。其分子式为C11H17O8N3，分子量为319，该神经毒素经腹腔注射对小鼠的LD50为8μg/kg。TTX的化学性质稳定，一般烹调手段难以破坏。        河鲀毒素是一种重要的天然毒素。1909年日本学者田原纯首先从河鲀鱼中发现，并定名Tetrodotoxino 1950年-1957年间，横尾晃、津田藤介等人首先从红鳍东方鲀，紫色东方鲀卵巢中独立地分离到了结晶态的河鲀毒素。其为无臭、易潮解的白色结晶体。该毒素结构的测定由Woodward（哈佛大学）、平田和后藤（名古屋大学）及津田小组（东京大学一三共中央研究所）等分别完成。1964年在京都召开的国际天然产物化学会议上同时报告了TTX的正确结构，是一种分子量不大，但结构很复杂的笼形原酸酯类生物碱，分子中几乎所有的碳原子均有不对称取代。因此它也被称为“自然界最奇特的分子之一”。 TTX是一种氨基全氢喹唑啉（Aminoperhydroquinazoline）型化合物，为白色结晶，无臭无味，微溶于水，不溶于有机溶剂；对酸作用稳定，对碱极不稳定；没有确定熔点，220℃以上炭化。TTX的结构特征是有1个碳环，1个胍基，6个羟基，在C-5和C-10位有一个半醛糖内酯连接着的分开的环。在胰液酶、唾液淀粉酶、乳化酶、糖转化酶等酶类存在下不分解。只溶于酸性水或醇溶液，在碱水溶液中易分解，在5%氢氧化钾溶液中于90-100℃下可分解成黄色结晶2-氨基-羟甲基-8-羟基-喹唑啉。它是相当特殊的一种有机化合物，分子内的胍基与氮原子是质子化的，正羰酸也离解为阴离子，所以河鲀毒素是以内盐形式存在。在室温下用50 g/L的氢氧化钡处理河鲀毒素可得脱水河鲀毒素—由pKa1值为2.5的羧基和pKa2值为10.9的胍基组成的两性离子化合物，其可在水中与一分子的溴完全反应产生河鲀酸。河鲀毒素在酸中也能部分异构化为脱水表河鲀毒素，从而影响对河鲀毒素的提取纯度。所以，河鲀毒素制剂经过长时间放置可降解。至于河鲀酸是否具备毒性尚有争议。因此，在生物代谢过程中，脱水和脱氧过程会降低毒性，而加氧机制能够使毒性增强。 毒素结构式图册参考资料。   在河鲀鱼中，河鲀毒素与其同系物是同时存在的。 河鲀毒素的同系物种类较多，从河鲀、纽虫、两栖类等生物体内分离得到的同系物包括：4-epiTTX，6-epiTTX，11-deoxyTTX，11-deoxy-4-epiTTX，11-norTTX-6（R）-ol，11-norTTX-6（S）-ol，11-norTTX-6,6-diol，4,9-anhydroTTX，11-oxoTTX，4,9-anhydro-4-epiTTX，4,9-anhydro-11-deoxyTTX，5-deoxyTTX，tetrodonicacid，4，9-anhydro-6-epi-TTX、5,6,11-trideoxyTTX、4-CysTTX等。 这些同系物可能与河鲀毒素的代谢或生物合成有关。在河鲀毒素的同系物中，5-deoxyTTX、5,6,11-trideoxyTTX、4-CysTTX、4,9-anhydroTTX、4,9-anhydro-6-epi-TTX、河鲀酸等同系物的毒性较低，甚至无毒，而11-oxoTTX虽比较罕见，其毒性却是TTX的4-5倍。 它们与河鲀毒素性质相似，有一定的生理活性，如：河鲀毒素的小鼠LD50为10μg/kg，6-表河鲀毒素为60μg/kg，11-去氧河鲀毒素为71μg/kg。 合成示意图图册参考资料。     TTX具有镇痛、降压、抗心律失常、局麻、戒毒及抑瘤的功效。对河鲀毒素的提取分离研究首先是晶化问题。自从田原于1909年首次分离到TTX的粗素以来，经过了40年，直到横尾（1950）、津田（1952）、荒川（1956）、平田（1957）等人，才分离出TTX结晶，其分离方法分别为：横尾法（氧化铝柱层析），津田—河村法（圆形滤纸层析法），津田—河村大规模生产法（活性炭层析法），平田—后藤法（离子交换树脂—活性炭吸附法）等。通常TTX的提取步骤是：河鲀卵巢—水提取—除蛋白质—离子交换—脱色—活性炭吸附—浓缩—精制—结晶。现代分离河毒素多采用层析法，其具体方法如下：首先，把富含毒素的样品绞碎，与含1%醋酸的甲醇液一起匀浆以抽提河毒素，匀浆液经5000-6000r/min，离心10-15min，沉淀物再用以上方法重复两次。合并上清液，减压浓缩，并用氯仿除去脂肪。之后经过冷冻干燥或再减压浓缩，浓缩液经Bio-Gel-P2或CM-Sephadex C-25（NH4+）或Amberlite IRC-50（NH4+）层析，用0.1-0.4 mol/L醋酸洗脱，合并有毒成分，浓缩后再经Bio-Rex70（H+）层析，以0.1-0.3mol/L醋酸洗脱，然后再重复一次，Bio-Rex70（H+）柱层硒，即可得到纯度非常高的样品。 日本人田原最早制得的TTX，纯度只有0.2%，半数致死量LD50为4.1mg/kg；横尾用磷钨酸、苦味酸汞、苯肼、苦味酸汞和苦酮酸等依次处理，得到的粗毒素的LD50为800μg/kg；此后，横尾又采用氧化铝柱直接过滤的方法制备，得到的TTX的LD50为13μg/kg。中国于1958年开始进行TTX的提取分离工作。陈成添等采用热甲醇法、微火煮沸法、沸水浴法对河鲀混合卵和混合肝的毒素进行提取，结果显示，用这三种方法提取的混合卵毒力的均值分别为：热甲醇法1524，微火煮沸法2518，沸水浴法2491。微火煮沸法和沸水浴法提取效果较佳，热甲醇法较差。杨春等以含毒量低的棕斑腹刺鲀为对象，研究以甲醇、乙醇、乙酸、水等4种溶剂提取TTX，结果发现乙酸的提取效果最好。 林文銮等提出用甲醇乙酸法提取TTX较完全，以活性炭脱色纯化的效果最好，但毒力有一定的损失。 李世平等以离心法取代传统过滤法，并用减压浓缩法去除提取液中的乙醚，改进了乙酸提取法，提高了得率。TTX的分离和提取大多采用离子交换、活性炭柱层析及凝胶柱层析、吸附树脂等方法。津田一河村用活性炭层析，采用以甲醇提取的浸膏上活性碳柱，以0.8%醋酸-10%甲醇-水洗脱，粗结晶溶于醋酸，加入氨水，低温下重结晶，1000kg卵巢中可获得10gTTX。 郭慧清等联合采用吸附树脂D+D101与弱酸性阳离子交换树脂D152提取河鲀毒素，改进了除蛋白质的方法。 中国海洋大学的崔建洲等利用D201大孔树脂层析、超滤、离子交换层析、分子筛层析、反相制备液相色谱等方法，从假睛东方鲀的肝脏中分离纯化得到TTX晶体，得率为81.1%。另外，中国国家海洋局第三研究所采用多重膜分离提取技术结合高效液相色谱法制备河鲀毒素纯品，纯度可达99.0%以上。 苦味酸盐法的氨解也可制备TTX纯品，其步骤如下：将粗品毒素（3.2g）和苦味酸（2.3g）溶于29 ml沸水之中，趁热过滤。冷却滤液，分离结晶沉淀，此沉淀在热水中重结晶3次，得黄色针状结晶的TTX苦味酸盐（4.8g）。此盐在200℃以上变黑，但不溶。元素分析样品需于80-100℃真空干燥20h。用4.7g苦味酸盐在热水中溶解，以氨水调节pH至9，冷却后，过滤出沉淀固体并加水洗涤。再溶于少量稀醋酸，加入氨水再沉淀，可得到纯TTX 2.6g。 根据河鲀毒素的微生物起源，分离出产河鲀毒素的微生物类群，通过微生物发酵来产生河鲀毒素。产TTX 的微生物类群有弧菌属（Vibrio）的溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）和鳗弧菌（Vibrio anguillarum），假单胞菌属（Pseudomonas），希瓦氏菌属的腐败希瓦菌（Shewanella putrefy aciens），交替单胞菌（Alteromonas），芽孢杆菌属（Bacillus），链霉菌属（Streptomyces），其中产毒力较高的主要是溶藻弧菌和河鲀毒素互生单胞菌（Alteromonas tetrodonis）。但微生物产河鲀毒素产量非常低，仅为ng级。其产生机制尚不清楚。

8. 河鲀毒素的预防与救治

河鲀鱼营养丰富，味道鲜美，有长江第一鲜之称。河鲀鱼的食用在中国、日本等亚洲国家有着悠久的历史，并逐渐形成特有的河鲀饮食文化。日本还将河鲀宴视作国宴，招待贵宾。然而，即使对河鲀烹调人员进行专业培训，饭店得到卫生部门许可及实施特许经营，如加工处理不当，还会引起食物中毒及致残致死事故，严重威胁人们的生命安全。统计在1972-1993年间，仅日本发生河鲀中毒者就达1258人，致死279人之多。中国河鲀中毒事件较多，最高为1993年，死亡147人。  河豚毒素对热稳定，于100℃处理24h或120℃处理20-60min方可使毒素完全破坏。中国古书曾记载“河豚出于江海，有大毒，能杀人。”明代黄省曾的《鱼经》云：“凡烹调者，腹之子、目之精、脊之血必尽弃之。”“凡洗宜极净，煮宜极熟，治之不中度，不熟则毒于人。”这说明在烹调过程中河豚毒素是很难除去。因此：加强河豚鱼知识宣传，了解毒性，避免误食或贪其美味但处理不当而中毒；对于某些毒性较小的河豚鱼品种应在专门单位由有经验的人进行加工处理之后制成罐头或干制品用于食用。 由于河豚毒素在极低浓度即可阻塞Na+通道，使河豚鱼中毒潜伏期缩短，绝大多数在食用后10~45 min发病，病情发展迅速，先是皮肤有麻或刺痛感，很快延及手指、四肢及其它部位，产生广泛的肌肉麻痹；消化系统出现呕吐、腹泻，严重者可致呼吸肌麻痹、血压下降、循环衰竭。国内外尚无特效解毒剂，一般采用综合对症治疗措施，如早期服用1%硫酸铜100 mL催吐；用1:5 000高锰酸钾或0.2%活性炭悬浮液洗胃；静脉注射高渗或等渗葡萄糖溶液，以促进毒素的尽快排泄；维持呼吸；解毒，莨菪类药物包括阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、樟柳碱等大剂量应用对救治河豚鱼类中毒有显著效果；肌肉麻痹者可肌注1%盐酸士的宁2ml及维生素B2、B6去麻痹，咖啡因、山梗烷醇酮和硫代硫酸钠与生理盐水一起静脉注射也有显著疗效。同时可采取补液等对症治疗措施。  自1990年《水产品卫生管理办法》颁布以来，中国的法律规定就禁止食用鲜河鲀，这是基于生长在深海的剧毒河鲀鱼肌肉有毒而作出的防范规定。江苏省地方标准DB32/T 543-2002“无公害家化暗纹东方鲀安全加工操作规范”规定该品种的肌肉TTX含量不应超过10MU/g，而其余部位包括卵巢、肝脏、脾、肾、血液、眼球、胆、胃、肠、心脏、腮均作为有毒废弃物处理。